伍豐液相色譜儀作為一種分離分析方法,應(yīng)用廣泛,具有分析效率高、選擇性好、分析速度快、檢測靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點(diǎn)。
伍豐液相色譜儀的工作流程:貯液器中經(jīng)過濾的流動相由高壓輸液泵以穩(wěn)定的流速或壓力輸送到色譜柱入口;(若采用梯度淋洗方式常需雙泵系統(tǒng)完成流動相的輸送)樣品由進(jìn)樣器自進(jìn)樣口注入后隨流動相流經(jīng)色譜柱,在色譜柱中完成組分分離。分離后的組分隨流動相離開色譜柱依次進(jìn)入檢測器,檢測器將檢測到的信號輸給記錄儀(工作站)或其它數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄、處理和保存。
在伍豐液相色譜儀的使用過程中,有時會有異常色譜峰的出現(xiàn)以及重現(xiàn)性不好的問題,這主要是由于操作方法不當(dāng)所引起,要想解決此類問題,需從以下幾個方面入手。
1、進(jìn)樣量的控制。用進(jìn)樣閥來進(jìn)樣時,閥內(nèi)的樣品環(huán)是定量的,(一般分析型進(jìn)樣閥的樣品環(huán)體積為20ul),由于進(jìn)樣時,注射到進(jìn)樣閥內(nèi)的樣品溶液在樣品環(huán)的管路中有徑向的速度梯度(即管軸處比管壁處的液流速度快)。因此,要想使樣品環(huán)中充滿樣品溶液,從而使用進(jìn)樣閥來準(zhǔn)確地定量,則必須使進(jìn)樣量大于樣品環(huán)體積的2倍。如果用注射器來控制進(jìn)樣量,則大只能注射樣品環(huán)體積1/2的量,這樣才能防止部分樣品由溢流管溢出從而導(dǎo)致定量分析的誤差。
2、進(jìn)樣閥的清潔問題。如果樣品環(huán)中有上次進(jìn)樣時樣品的殘留,必然會污染下次注射進(jìn)的樣品,為防止這種現(xiàn)象的發(fā)生,應(yīng)按下列步驟操作:a.進(jìn)樣閥有2個位置,INJECT和LOAD。首先在LOAD位置時,以注射器將流動相注入進(jìn)樣閥內(nèi)清洗幾次,每次用量大約40ul;b.然后將進(jìn)樣閥板手扳至INJECT位置時,再以流動相清洗幾次,每次用量還是40ul;c.后,再將樣品注射到進(jìn)樣閥里。按照上述的步驟操作,可以避免由進(jìn)樣閥引起的污染,從而使干擾峰消除并提高分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。
3、進(jìn)樣閥溢流管的堵塞。有時,進(jìn)樣閥的溢流管會發(fā)生堵塞現(xiàn)象,向進(jìn)樣閥內(nèi)注射樣品時,注射針推不動。此故障是由于溢流管的堵塞所致。堵塞的原因多半是由于溶解樣品的流動相用的是鹽溶液,而其中的鹽在溢流管的排空端口處結(jié)晶所致。此時,可用小燒杯盛少量蒸餾水對溢流管口稍加浸泡,端口處鹽的結(jié)晶就能被溶解掉,故障排除。如能在每次進(jìn)樣完成之后,用蒸餾水反復(fù)沖洗至溢流管中的鹽分全部沖出,則可避免此故障的發(fā)生。